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항이디오타입 항체

배경

항-이디오타입 항체는 다른 항체의 가변 영역을 인식하고 특이적 결합을 생성하는 항체입니다. 항-이디오타입 항체는 의약품 개발에 널리 사용되며 면역원성 분석에 중요한 참고로 사용될 수 있으며 생체 내 항체 약물 수준을 특이적으로 검출할 수 있으며 약물동태학 연구에 중요한 시약입니다.

위의 연구를 지원하기 위해 ACROBiosystems는 면역원성 분석 및 약물동태학 연구를 위한 일련의 고친화성, 고특이성 항이디오타입 항체를 개발했습니다. 각각의 항이디오타입 항체에 대해, 우리는 약물 개발 과정을 최대한 가속화하기 위해 다양한 응용 시나리오에 따라 해당 실험 프로토콜을 개발할 것입니다.현재 제품은 adalim*mab, Ritux*mab, Cetux*mab, Trastuz*mab, and Bevaciz*mab, bevacizumab 등과 같은 많은 인기있는 항체 약물을 커버했습니다.

제품 목록
MoleculeCat. No.AntigenNeutralizing ActivityApplication
Adalimu*abADB-Y19Anti-Adalimu*ab Antibodies (AY19)Neutralizing AntibodyADA assay; Neutralizing assay; Indirect ELISA
Adalimu*abADB-Y23bAnti-Adalimu*ab Antibodies (AY23b) (recommended for PK/PD)Non-Neutralizing AntibodyPK bridging ELISA; Indirect ELISA
Bevacizu*abBEB-Y10Anti-Bevacizu*ab Antibodies (AY10) (MALS verified, recommended for PK/PD)Neutralizing AntibodyPK bridging ELISA; Neutralizing assay; Indirect ELISA
Bevacizu*abBEB-Y12Anti-Bevacizu*ab Antibodies (AY12) (recommended for neutralizing assay)Neutralizing AntibodyADA assay; Neutralizing assay; Indirect ELISA
Bevacizu*abBEB-Y9Anti-Bevacizu*ab Antibodies (AY9) (recommended for ADA assay)Neutralizing AntibodyADA assay; Neutralizing assay; Indirect ELISA
Bevacizu*abBEB-BY13Biotinylated Anti-Bevacizu*ab Antibodies (AY13) (recommended for PK/PD)Neutralizing AntibodyPK bridging ELISA;Neutralizing assay; Indirect ELISA
Cetuxi*abCEB-Y27Anti-Cetuxi*ab Antibodies (AY27) (recommended for ADA assay)Neutralizing AntibodyADA assay; Neutralizing assay; Indirect ELISA
Cetuxi*abCEB-Y31Anti-Cetuxi*ab Antibodies (AY31) (Non-Neutralizing)Non-Neutralizing AntibodyADA assay; Indirect ELISA
Cetuxi*abCEB-Y29Anti-Cetuxi*ab Antibodies (AY29) (recommended for PK/PD)Neutralizing AntibodyPK bridging ELISA; Neutralizing assay; Indirect ELISA
Cetuxi*abCEB-Y28Anti-Cetuxi*ab Antibodies (AY28)Neutralizing AntibodyADA assay; Neutralizing assay; Indirect ELISA
Cetuxi*abCEB-BY31Biotinylated Anti-Cetuxi*ab Antibodies (AY31) (recommended for PK/PD)Non-Neutralizing AntibodyPK bridging ELISA; Indirect ELISA
Rituxi*abRIB-Y36Anti-Rituxi*ab Antibodies (AY36) (recommended for ADA assay)Neutralizing AntibodyADA assay;Neutralizing assay; Indirect ELISA
Rituxi*abRIB-Y37Anti-Rituxi*ab Antibodies (AY37) (recommended for PK/PD)Neutralizing AntibodyPK bridging ELISA;Neutralizing assay;Indirect ELISA
Rituxi*abRIB-FY35cFITC-Labeled Anti-Rituxi*ab Antibodies, Mouse IgG1Neutralizing AntibodyADA assay;Neutralizing assay; Indirect ELISA
Rituxi*abRIB-Y35cAnti-Rituxi*ab Antibodies (MALS verified)Non-Neutralizing AntibodyADA assay; Indirect ELISA
Trastuzu*abTRB-Y5bAnti-Trastuzu*ab Antibodies (AY5b) (recommended for PK/PD)Neutralizing AntibodyPK bridging ELISA
Trastuzu*abTRB-Y1bAnti-Trastuzu*ab Antibodies (AY1b) (recommended for PK/PD)Neutralizing AntibodyPK bridging ELISA; Neutralizing assay; Indirect ELISA
애플리케이션
ADA 분석 - 완벽한 교정용 표준기

거의 모든 생물학적 제제는 특정 항약물 항체(ADA)를 생성하며, ADA의 생성은 약물의 효능을 감소시키거나 심각한 부작용을 유발할 수 있습니다. 전임상 연구에 따르면 ADA는 약물 노출, 약물 독성, 약물동태학 및 약력학에 영향을 미칠 수 있습니다. 생물학적 분자의 면역원성을 평가하고 실험 결과를 임상 사건과 연결하기 위해서는 전임상 및 임상 연구 모두에서 ADA 반응을 효과적으로 평가할 수 있는 신뢰할 수 있는 실험 방법을 개발할 필요가 있습니다.

ADA 검출 방법은  표준화된 ADA표준품이 없어서 일반적으로 비정량적 실험입니다. 양성 대조군은 일반적으로 사내에서 개발된 단클론 또는 다클론 항체를 사용하니까 시간이 많이 걸립니다. 이 문제를 해결하기 위해 ACROBiosystems는 해당 항체 및 바이오시밀러의 ADA 검출 표준으로 일련의 ADA를 개발했습니다.

적용 사례 1 -  Anti-Rituximab Antibodies (RIB-Y36

Anti-Ritux*mab Antibodies bridging ELISA for Anti-Drug Antibody (ADA) assay development. Immobilized Ritux*mab at 1 µg/ml, added increasing concentrations of Anti-Ritux*mab Antibodies (Cat. No. RIB-Y36, 10% human serum) and then added biotinylated Ritux*mab at 2 µg/ml. Detection was performed using HRP-conjugated streptavidin with a sensitivity of 9.7 ng/mL.

Anti-Ritux*mab Antibodies bridging MSD for Anti-Drug Antibody (ADA) assay development. Added the mix solution (biotinylated Ritux*mab at 5 µg/mL, SULFO-Ritux*mab at 5Nµg/mL and increasing concentrations of Anti-Ritux*mab Antibodies (Cat. No. RIB-Y36, 100% human serum). Detection was performed using MSD Assay with a sensitivity of 0.97 ng/mL.

적용 사례2- Anti-Adalimumab Antibodies (ADB-Y19

Anti-Adalim*mab Antibodies bridging ELISA for Anti-Drug Antibody (ADA) assay development. Immobilized adalim*mab at 1 µg/ml, add increasing concentrations of Anti-Adalim*mab Antibodies (Cat. No. ADB-Y19, 10% human serum) and then add biotinylated adalim*mab at 5 µg/ml. Detection was performed using HRP-conjugated streptavidin with a sensitivity of 0.6 ng/mL.

Measured by its neutralizing ability in a functional ELISA. Immobilized adalim*mab at 0.5 μg/mL (100 μL/well) can bind pre-mixed Anti-Adalim*mab Antibodies (Cat. No. ADB-Y19) and Biotinylated Human TNF-alpha (Cat. No. TNA-H82E3) with an inhibition rate of 100%.

PK 분석 - 생체 내 항체 약물 수준의 특이적 검출

ELISA는 항체 약물의 혈중 농도 검출에 가장 많이 사용되는 기법이며, 간접 ELISA는 그 중 가장 간단하고 보편적인 방법이다. 이 방법은 조작이 간단하고 감도가 높다는 장점이 있습니다. 그러나 2차 항체는 일반적으로 Anti-Human IgG를 선택하기 때문에 비특이성 배경이 높고, 기질 간섭을 피하기 위해 기질를 1000배 이상 희석해야 합니다. 이 문제를 해결하기 위해 항이디오타입 항체를 사용하여 기질에서 항체 약물 수준을 감지했습니다. 특히, 브리징 ELISA 형식을 사용하여 항-이디오타입 항체 쌍으로 항체 약물 수준을 감지하면 비특이적 배경을 크게 줄일 수 있습니다.

Comparison between anti-idiotypic capture ELISA and anti-idiotypic bridging ELISA for Ritux*mab detection in patient samples. Left: anti-idiotypic capture ELISA; Right: anti-idiotypic bridging ELISA.

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Detection of Ritux*mab by bridging ELISA in serum. Immobilized Anti-Ritux*mab Antibodies (Cat. No. RIB-Y37) at 2 μg/ml, added increasing concentrations of Ritux*mab (10% human serum) and then added biotinylated Anti-Ritux*mab Antibodies (Cat. No. RIB-BY35) at 1 μg/ml. Detection was performed using HRP-conjugated streptavidin with a sensitivity of 1 ng/ml.

제품 특징
높은 친화력
친화력는 항원과 항체 사이의 결합력을 나타내는 것으로 KD값으로 표현되며 KD값이 작을수록 항체의 친화력이 강해진다. 우리는 SPR 방법을 사용하여 모든 항-이디오타입 항체의 친화도를 테스트했으며 이 데이터을 이해하면 방법론 개발 과정에 방법 의 감도를 예측하는 데 도움이 되는 것입니다.

Anti-Adalim*mab Antibodies (mouse IgG1, Cat. No. ADB-Y19) captured on CM5 chip via anti-mouse antibodies surface, can bind human adalim*mab with an affinity constant of 1.36 pM.

높은 특이성
각 제품에 대해 해당 항체 약물, 항체 약물 타깃, 다른 IgG 하위 유형 및 동일한 하위 유형의 기타 항체 약물을 포함하여 특이성 검출을 수행했으며 다른 단백질이나 항체가 아닌 해당 항체 약물만 결합됩니다.
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Demonstration of the specificity of Anti-Cetux*mab Antibodies (Cat. No. CEB-Y28) to the Cetux*mab.

높은 안정성
ACROBiosystems는 제품의 안정성 확보를 위해 가속 실험과 동결-해동 실험을 통해 제품 안정성을 검증할 예정이며, 테스트를 거쳐 품질 및 활성에 영향이 없는 것으로 확인된 제품만 출시할 예정입니다.

Reconstituted Anti-Trastuz*mab Antibodies were diluted to 0.4 mg/ml, aliquoted and placed at 37°C. Aliquots were removed from 37°C at every time point and placed at 4°C along with the control. No significant loss of activity was observed.

Anti-Trastuz*mab Antibodies were subjected to the indicated number of freeze-thaw cycles (FT). No significant loss of activity was observed.

약물동태학에 대한 추가 정보
ACRO Quality

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