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유도만능 줄기세포 배양을 위한 성장인자

유도만능 줄기세포 배양을 위한 성장인자
개요
인간 유도만능 줄기세포(induced pluripotent stem cell, iPSC)는 세포 치료를 위한 ‘무제한 공급처’로, 특별한 자가 재생 특성과 유전자 조작 능력을 갖추고 있습니다. 또한 사이토카인과 성장인자의 올바른 조합을 통해 iPSC는 T 세포, NK 세포 및 대식세포를 비롯한 다양한 유형의 면역 세포로 분화될 수 있습니다. 전반적으로, iPSC 분화된 면역 세포는 현재 자가 세포 치료법의 광범위한 적용을 방해하는 주요 장애물 중 하나를 극복하여 동종이형 '기성품' 세포 치료제 개발을 향한 첫 번째 단계가 될 수 있습니다.
Cancers 2022, 14, 2266

Cancers 2022, 14, 2266

iPSC-T 세포

iPSC-T Cell

iPSC 유래 T 세포를 생성하는 고전적인 접근 방식은 다음에서 시작됩니다:

1. CD34+ 조혈 전구 세포를 생성하기 위해 뮤린 골수기질세포주(C3H10T1/2 또는 OP9)와 건강한 기증자로부터 유래된 iPSC의 공동 배양.

2. 조혈 전구체를 농축하여 DLL-1/DLL-4를 과발현하는 OP9 세포주와 T 세포 분화를 유도하기 위해 추가 사이토카인과 함께 공동 배양.

iPSC-NK 세포

iPSC-NK Cell

iPSC 유래 NK 세포를 생성하기 위해 다음을 수행합니다:

1. 건강한 기증자로부터 유래된 iPSC를 뮤린 골수기질세포주 M210-B4와 함께 약 20일 동안 공동 배양하여 CD34+조혈 전구체를 생성합니다.

2. 그런 다음 CD34+조혈 전구체를 농축하여 뮤린 AFT024(태아 간 유래 기질세포주) 또는 EL08-1D2 기질세포 그리고 정의된 사이토카인과 함께 4~5주 동안 공동 배양하여 성숙한 NK 세포를 생성합니다.

iPSC 대식세포

iPSC-Macrophage

iPSC 유래 대식세포 Mφs의 형성에는 보다 복잡한 방법이 필요합니다:

1. 배양체(Embryoid body, EB) 형성은 iPSC 유래 Mφs를 분화하기 위해 가장 일반적으로 사용되는 방법으로, 회전식 서스펜션, 마이크로웰(microwell) 접근법, 미세유체 행잉 드롭 칩(microfluidic hanging drop chip) 등의 특정 수정을 활용합니다.

2. iPSC 유래 EB가 형성된 후, GM-CSF, M-CSF, IL-3 및 IL-4를 포함한 사이토카인 보충을 통해 골수성 Mφs가 추가로 유도됩니다.

제품 특징
iPSC 배양 및 분화에 대한 연구를 지원하기 위해 ACROBiosystems는 IL-3, IL-7, IL-15, DLL4 및 Flt-3L을 포함한 일련의 고품질 사이토카인을 개발했습니다. 이 제품들은 iPSC 유도 및 분화 배양에 적합하여 세포 치료제 개발 프로세스를 지원합니다.

멸균

동물 유래 성분 비포함

고순도 ≥95%

세포 기반 분석으로 검증된 높은 생체활성

ActiveMax®, 프리미엄 및 GMP 등급 사용 가능

낮은 엔도톡신 ≤0.1 EU/μg

무운반체

자연적 구조 및 형태 및 변형과 유사

배치 간 일관성

GMPvsPremium

프리미엄에서 GMP로의 전환

사이토카인은 세포 및 유전자 치료(cell and gene therapy, CGT) 약물의 세포 배양에 사용되는 중요한 원료입니다. 보통 전임상 단계에서는 원료의 안전성과 품질 모두 우선 순위에 해당하지 않습니다. 이 경우 연구용 제품만 사용할 수 있습니다. 그러나 CMC나 임상 단계 등 후기 신약 개발 단계로 진행되면, 규제 가이드라인을 준수하기 위해 원료를 GMP 등급의 재료로 대체해야 합니다. 이 전환기에는 새로운 원료를 재평가하고 밸리데이션하는 데 많은 에너지가 투입됩니다.

전임상 개발에서 임상 단계로의 이러한 전환을 용이하게 하기 위해 ,당사는 생체 활성이 거의 동일한 것으로 평가된 여러 등급의 사이토카인과 GMP 제품에 필요한 문서를 제공합니다. 초기 개발 단계에서 프리미엄 등급 원료를 사용한 후 CMC 또는 임상 단계 진입 시 당사의 GMP 등급 원료로 원활하게 전환하여 재평과 및 밸리데이션 연구 횟수를 최소화하는 것을 권장합니다.

지원 데이터

고순도

GCF-H5214

GMP Human IL-15 Protein on SDS-PAGE under reducing (R) condition. The gel was stained overnight with Coomassie Blue. The purity of the protein is greater than 95%.

LIF-H521b

Human IL-2, premium grade on SDS-PAGE under reducing (R) condition. The gel was stained overnight with Coomassie Blue. The purity of the protein is greater than 95%.

LIF-H521b

Human DLL4 Protein, Fc Tag, premium grade on SDS-PAGE under reducing (R) condition. The gel was stained overnight with Coomassie Blue. The purity of the protein is greater than 95%.

높은 생체활성

Human VEGF165, premium grade (Cat. No. VE5-H4210) stimulates proliferation of human umbilical vein endothelial cells (HUVEC). The ED50 for this effect is 4.216-9.281 ng/mL.


                   

Human IL-2, premium grade (Cat. No. IL2-H5215) stimulates proliferation of CTLL-2 cells. The EC50 for this effect is 1.996 ng/mL, corresponding to a specific activity of 5 ⅹ10^6 IU/mg, which is calibrated against Interleukin-2 (Human, rDNA derived) (2nd International Standard) (NIBSC code: 86/500).

Immobilized Human DLL4 Protein, Fc Tag, premium grade (Cat. No. DL4-H5259) at 1 μg/mL (100 μL/well) can bind Monoclonal Anti-Human DLL4 Antibody, Human IgG1 with a linear range of 1-16 ng/mL.


>  ACROBiosystems Laminin proteins could maintain the stemness of iPSCs.
Laminin 521(Cat. No. LA5-H5261
LA5-H5261

Laminin 521 (LA5-H5261) could maintain the stemness of iPSC. Immunofluorescent staining indicated that the iPSCs expressed high levels of pluripotency associated markers Sox2, TRA-1-60, SSEA4 and OCT4.

Laminin 511(Cat. No. LA8-H5283
LA8-H5283

Laminin 511 (LA8-H5283) could maintain the stemness of iPSC. Immunofluorescent staining indicated that the iPSCs expressed high levels of pluripotency associated markers Sox2, TRA-1-60, SSEA4 and OCT4.

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