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Anti-CD19(FMC63) CAR를 검출하는 특이성 항체

유세포 분석 에 의해 검증된 항체 특성 프로토콜 무료 제공

Anti-CD19(FMC63) CAR를 검출하는 특이성 항체
배경

CD19는 현재 CAR-T 세포 트리몬트 분야에서 가장 널리 사용되는 표적으로, 많은 연구에서 CD19가 B-ALL, CLL 및 B 세포 림프종의 트리몬트에 효과적이고 안전한 표적임을 보여주었습니다. FMC63은 인간 CD19를 표적으로 하는 쥐 단일클론 항체입니다. 지금까지 보고된 CART19 임상시험의 대부분은 FDA 승인을 받은 두 가지 Anti-CD19 CAR-T 세포 약물인 Kymriah와 Yescarta를 포함한 FMC63 항체 서열을 기반으로 한 CAR-T입니다.

그러나 시중에 나와 있는 대부분의 기존 CD19 항원은 검출 수요를 충족할 만큼 민감하지 않은데, ACROBiosystems에서 개발한 고친화성 인간 CD19 단백질은 Anti-CD19 CAR의 양성 발현율을 검출하는데 높은 특이성과 높은 감도를 보였고  Anti-CD19 CAR-T 개발 중, 지발 바이러스 포장 후 역가 측정, CAR 유전자 전염/형질 도입 효율 검출, Anti-CD19 CAR-T 세포의 품질 관리 방행에 널리 사용되고 있으며 업계에서 널리 알렸습니다.

고친화성 인간 CD19 단백질에 이어, ACROBiosystems는 FMC63 scFv의 항원 인식 에피토프를 특이적으로 표적으로 하는 항이디오타입 항체를 계속 출시하여 FMC63 CAR의 검출 방법을 더욱 강화했습니다. 이 항체는 고친화성 인간 CD19 단백질과 동일한 고감도, 높은 특이성 특성을 가지고 있으며, FCM(Flow Cytometry)방법으로  Anti-CD19(FMC63) CAR 발현의 검출에 적합한 것으로 충분히 검증되었습니다.

Anti-FMC63 항체는 세포 분리 및 세포 배양 응용을 위해 특별히 설계되었으며 동물 제작 없는 조건으로 생산될 수 있다. 동물 유래 성분은 생산 과정 전반에 걸쳐 사용되지 않습니다. 무균 및 엔도톡신 테스트를 포함한 포괄적인 테스트를 포함한 엄격한 품질 관리 시스템에서 생산됩니다. 초기 임상 전 단계에서 세포 배양과 사용 및 기타 응용 프로그램의 호환성을 보장하기 위해 제품 성능은 신중한 검증과 테스트를 거쳤습니다.

제품 목록
분자제품 번호소속제품 설명
제품 특징

높음 특이성과 배경이 없이 Anti-CD19(FMC63) CAR-T 임상 샘플을 검출할 수 있습니다.

Detection of Anti-CD19 (FMC63) CAR Expression

2e5 of FMC63 scFv-based anti-CD19 CAR-293 cells were stained with 100 µL of the working solution of Monoclonal AntiFMC63 scFv Antibody, Mouse IgG1 (Cat. No. FM3-Y45) and isotype control respectively, washed and then followed by PE anti-mouse IgG1 Antibody and analyzed with flow cytometry (QC tested).

Assessment of Non-specific Binding to 293 Cells

Non-specific binding of Monoclonal Anti-FMC63 scFv Antibody (Cat. No. FM3-Y45) to non-transfected 293 cells was determined by flow cytometry. The data showed that Anti-FMC63 scFv Antibody didn’t bind to non-transfected 293 cells.


Assessment of Non-specific Binding to PBMCs

Non-specific binding of Monoclonal Anti-FMC63 scFv Antibody (Cat. No. FM3-Y45) to non-transfected human PBMCs was determined by flow cytometry. The data showed that Anti-FMC63 scFv Antibody didn’t bind to non-transfected human PBMCs.

Anti-CD19(FMC63) CAR의 항원 결합 부위를 보다 민감하고 특이적으로 인식할 수 있습니다.

Binding Activity and Specificity Measured by ELISA

Immobilized FMC63 scFv, His Tag at 2 μg/mL (100 μL/well) can bind Monoclonal Anti-FMC63 scFv Antibody, Mouse IgG1 (Clone Y45) with a linear range of 1-19 ng/mL. Anti-DNP antibody, mouse IgG1 (Cat. No. DNP-M1) was used as an isotype control (QC tested).


Neutralizing Activity Measured by ELISA

ELISA analysis shows that the binding of Human CD19, Fc Tag (Cat. No. CD9-H5251) to FMC63 scFv, His Tag was inhibited by increasing concentration of Monoclonal Anti-FMC63 scFv Antibody, Mouse IgG1 (Clone Y45). The concentration of Human CD19, Fc Tag used is 5 μg/mL (100 μL/well). The IC50 is 0.084 μg/mL (Routinely tested).

High Affinity Determined by SPR

Monoclonal Anti-FMC63 scFv Antibody, Mouse IgG1 (Cat. No. FM3-Y45) captured on CM5 chip via anti-mouse antibodies surface can bind FMC63 scFv with an affinity constant of 1.08 nM as determined in a SPR assay.

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