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효소 결합 면역흡착 분석(ELISA) 서비스

배경

효소 결합 면역흡착 분석법(ELISA)은 수십 년 동안 분석물 검출의 주요 방법 중 하나로 사용되어 왔습니다. 모든 약물 개발 연구의 핵심 실험의 고품질과 신뢰할 수 있는 ELISA 데이터는 과학적 이해와 추가 연구에 매우 중요합니다.

ACRO의 장점은 능숙한 기술과 풍부한 과학자 직원, 자체 생산한 대량의 단백질, 항특이형 항체를 포함한 항체 및 즉시 사용 가능한 ELISA 키트에서 비롯됩니다.

플랫폼

ACROBiosystems는 SpectraMax i3x 시스템(Molecular Devices)을 사용하여 고품질 흡광도, 형광 및 발광 측정을 제공합니다. ACROBiosystems는 또한 ScanLaterTM Western Blot 확장과 Alpha Screen 384 STD Assay Cartridge를 인수하여 고객에게 다양한 분석 옵션을 제공합니다.

장점
  • Spectral Fusion™ 조명으로 스펙트럼 전반의 민감도 향상

  • 냉각식 PMT로 확장된 다이내믹 레인지

  • FP, AlphaScreen 및 Western Imaging용 카트리지

SpectraMax i3x 시스템을 기반으로 하는 ACROBiosystems는 항체-항원 상호작용의 정량화 및 검출을 원하는 고객에게 생물의학 연구 및 개발 서비스를 제공합니다. 추가 서비스에는 항약물 활성(ADA), PK/PD 검사 및 항체 스크리닝이 포함되지만 그외에도 더 있습니다.

분석 보고서는 샘플 수령 후 2주 이내에 전달됩니다!

사례 연구
스크리닝

경쟁성 ELISA와 같은 일반적인 방법을 사용하여 펩타이드 스크리닝 및 항체 스크리닝을 포함한 스크리닝 서비스를 제공합니다.

예를 들어, 당사는 ACROBiosystem의 자체항SARS-CoV-2 중화 항체 역가 혈청학적 키트(제품 번호: RAS-N022)를 사용하여 펩타이드 샘플에 대한 스크리닝 분석을 수행할 수 있습니다.

키트의 마이크로플레이트는 Human ACE2 단백로 미리 코팅되어 있습니다. 첫째, 혈청 샘플, 양성 대조군, 음성 대조군을 웰에 첨가한 다음 HRP-SARS-CoV-2 Spike RBD를 첨가합니다. 샘플에 중화 항체가 있으면 ACE2와 HRP-SARS-CoV-2 Spike RBD 과의 결합에 경쟁합니다. 분석 신호의 강도는 항-SARS-CoV-2 중화 항체의 존재에 비례합니다. (존제가 높을수록 강도가 강함)

펩타이드 스크리닝
경쟁력 있는 ELISA를 기반으로 Peptide 9의 유사성과 동역학을 더 잘 이해합니다.

그림1. 펩타이드 9 스크리닝(SpectraMax i3x)을 위한 항-SARS-CoV-2 중화 항체 농도(μg/mL)에 대한 양성 참조.

그림2. 항-SARS-CoV-2 중화 항체 역가 혈청학적 키트(제품 번호: RAS-N022)(SpectraMax i3x)를 사용하여 펩타이드 9(uM)에 대한 샘플 스크리닝을 하였습니다.

항체 스크리닝

그림3. 다른 항 BCMA 항체는 BCMA 및 BAFF에 대해 다른 중화 능력을 갖습니다.

항체 친화성

항원 친화성 스크리닝 외에도 Fc 수용체 및 C1q에 대한 항체의 친화성은 각각 ADCC/ADCP 및 CDC 효과를 통해 세포를 사멸합니다. 따라서 항체 약물 후보의 개발 단계에서 Fc 수용체와 C1q의 연관성을 테스트하는 것이 필수입니다.

그림4. 의뢰인 마우스 혈장 샘플(SpectraMax i3X)에서 C3a의 농도를 결정하기 위한 마우스 보체 C3a의 표준 곡선.

항체효능

당사의 인간 TROP-2 / TACSTD2 단백질, His 태그(제품 번호: TR2-H5223)를 사용하여 제공된 항체의 효능을 테스트하기 위해 인간 TROP-2 및 고객 항체에 대한 결합 분석을 수행할 수 있습니다. 마이크로플레이트는 TROP-2로 코팅하여 밤샜습니다. 샘플 항체를 웰에 첨가한 다음, 2차 HRP 접합된 염소 항-마우스 IgG를 첨가합니다.의뢰인의 1차 항체가 TROP-2에 결합한 후 HRP 2차 항체가 1차 항체에 결합하고 TMB를 추가하면 신호 강도가 1차 항체의 농도에 비례합니다. (농도가 높을수록 신호 강도도 높음)

그림5. EC50(SpectraMax i3x)의 결합 곡선을 결정하기 위해 항-TROP-2 항체(nM)의 광학 밀도와 농도를 비교합니다.

ADA/PK 개발

이디오톱은 항체의 가변 부분에 대한 고유한 항원 결정기(에피토프) 세트입니다.항-이디오타입(Anti-ID) 항체는 다른 항체(일반적으로 항체 약물)의 이디오톱에 결합하므로 항체 약물 개발, 특히 면역원성 및 PK/PD 분석을 위한 매우 강력한 도구가 됩니다.

전임상/임상 면역원성 및 약동학 분석을 지원하기 위해 ACROBiosystems는 일련의 고친화성 항이디오타입 항체 및 ADA/PK 서비스를 개발했습니다.

그림6. 1 µg/ml로 고정된 Adali**mab, 증가하는 농도의 항-Adali**mab 항체(제품 번호 ADB-Y19, 10% 인간 혈청)를 추가한 다음, 5 µg/ml 비오틴화된 Adali**mab을 추가합니다. 검출은 HRP-conjugated를 사용하여 수행되었습니다.

비드 기반 ELISA

ACRO는 비드 기반 ELISA에 사용할 수 있는 공액 자기 비드를 개발했습니다.

장점
포괄적인 단백질 파이프라인 지원
경험이 풍부한 R&D 기술 팀
효율적인 프로젝트 운영 팀
맞춤형 솔루션 설계 및 보고서 형식
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