1) 단백질 제품은 동결 건조된 분말로 보관하고 단백질을 신선하게 재구성하는 것을 권장 합니다.대부분의 제품에서 동결 건조 분말은 액체보다 안정적입니다.

2) 반복되는 동결-해동 주기를 피하기 위해 COA에 따라 단백질을 재구성하십시오. 재구성된 단백질은 COA의 최소 분취량 미만으로 분주되어서는 안 됩니다.COA의 최소 분취량 미만인 경우 사용자가 보호를 위해 BSA 또는 HSA를 추가하는 것이 좋습니다. 사용자는 당연히 BSA 또는 HSA가 단백질로 실행하려는 분석을 방해하지 않는지 확인해야 합니다.이것은 표면 흡착 손실 및 비활성화로부터 단백질을 보호하는 데 중요합니다.

3) 재구성된 농도로 보관하는 것이 좋습니다.사용 농도가 권장 재구성 농도보다 낮은 경우 고객은 재구성 단백질을 희석하여 사용할 수 있습니다. 사용 농도가 권장 재구성 농도보다 높은 경우 고객은 먼저 COA에 따라 재구성한 다음 필요한 농도로 농축해야 합니다.

재구성된 제품을 4도 또는 RT에서 보관하지 않는 것이 좋습니다.단백질을 일정 기간 동안 여러 번 사용해야 하는 경우 1회용 분취량을 만들어 -70℃ 이하에서 보관하고 필요에 따라 동결된 바이알을 해동하는 것이 가장 좋습니다.우리는 한 번의 동결-해동 주기가 활동에 영향을 미치지 않는다는 것을 알고 있습니다.

단백질의 용해도는 트레할로스를 비롯한 제형의 다른 요인(동결건조 전)의 영향을 받습니다.일반적으로 얻을 수 있는 최대 농도는 동결 건조 전의 벌크 용액의 농도입니다.고객이 COA에서 권장하는 것보다 더 높은 재구성 농도를 만들어야 하는 경우 동결 건조 전 벌크 용액의 농도보다 높지 않은 농도로 제품을 재구성하는 것이 좋습니다.

1) 트레할로스는 단백질 용액을 안정화하고 가능한 응집 및 침전을 방지하는 데 많은 도움이 되므로 특히 높은 단백질 농도에서 제거하지 않는 것이 좋습니다.또한, 트레할로스는 1차 아민 또는 티올 관련 화학 반응을 방해하지 않습니다.예를 들어 SPR 분석에서 분석 물질로 사용되는 것과 같이 트레할로스 없이 이 단백질을 사용해야 하는 경우 사용 직전에 트레할로스를 제거하기 위해 버퍼 교환을 실행하는 것이 좋습니다.Vivaspin 한외여과 시스템과 같은 상업적으로 이용 가능한 키트가 많이 있습니다. 제품은 동결건조된 형태로 공급됩니다.

2)동결건조 전의 벌크 용액은 보호제로 트레할로스 10%를 함유합니다. 권장 재구성 후 트레할로스 농도는 제품 및 로트마다 다릅니다. 그러나 모든 관련 정보는 특정 배치 COA에 대해 제공됩니다.

트레할로오스는 취급 및 보관 중 단백질 활성 손실을 방지하기 위해 강력히 권장됩니다.트레할로스 없이 이 단백질을 사용해야 하는 경우 사용 직전에 트레할로스를 제거하기 위해 버퍼 교환을 실행하는 것이 좋습니다.Vivaspin 한외여과 시스템과 같은 상업적으로 이용 가능한 키트가 많이 있습니다.

COA에 게시된 유효 기간(표시된 보관 조건 기준)은 고객님이 실제로 제품을 받은 날짜부터입니다.

특정 배치 COA의 제형 부분에서 우리는 동결 건조 전 벌크 용액의 부피를 알 수 있었습니다. 농도=크기(ug/mg)/부피(ul)

모든 Fc-융합 단백질은 용액에서 Fc-매개 이량체화를 겪을 것입니다. 일부 Fc-융합 단백질은 단백질 자체의 구조에 따라 더 응집되어 큰 중합체를 형성할 수 있습니다. 생성된 단백질 (이량체/삼량체/중합체) )는 비환원 SDS 젤 또는 SEC의 밴드 크기에 의해 반영될 수 있습니다.

벌크 용액의 내독소 수준은 동결건조 제품의 내독소 수준을 나타낼 수 있습니다.경험에 따르면 동결건조 제품의 엔도톡신 검출값은 벌크 용액보다 20~30% 더 높습니다(정상 범위 내, 동결건조 시 양을 늘려야 하고 순도 계수를 고려해야 합니다.).당사의 동결 건조 공정은 열원 없이 엄격하게 멸균됩니다. 따라서 벌크 용액의 내독소 수준은 기본적으로 동결건조 제품의 내독소 수준을 나타낼 수 있습니다.

당사 제품은 대부분 캐리어 단백질을 첨가하지 않고 극히 일부 제품에는 BSA를 첨가합니다. 제품 웹사이트의 버퍼 정보를 참조하는 것이 좋습니다.

ACRO 바이오시스템의 대부분의 비오틴화된 단백질은 Avi 태그 단일 지점 부위 특이적 비오틴화를 기반으로 합니다. 이론적으로 분자/태그를 추가하면 잠재적으로 단백질의 자연 상태에 영향을 미치고 결과적으로 생물 활성에 영향을 미칠 수 있습니다. 그러나 비오틴 분자와 Avi 태그는 모두 작으며 표적 단백질 도메인 외부에 삽입됩니다. 또한 DoL(표기 정도)은 ACRO 바이오시스템의 특정 단백질에 최적화되어 생물 활성을 손상시키지 않으면서 최고의 검출 감도를 달성합니다.따라서 정상적인 단백질 활성이 라벨링 이벤트에 의해 영향을 받을 가능성은 거의 없습니다. 모든 표지된 단백질의 생물활성은 ELISA, FACS 또는 세포 기반 분석에 의해 항체 또는 리간드에 대한 결합을 테스트할 것입니다.

비오틴 제품은 담수화하여 유리 비오틴을 제거하며, 잔여 비오틴이 있을 경우에도 소량입니다.

ACRO에서 사용하는트레할로스는 주입 등급이며 실험 중에 희석됩니다. 이 경우 트레할로스는 세포에 영향을 미치지 않을 겁니다.우리는 버퍼 컨트롤 그룹이 실험적으로 설정될 수 있다고 제안합니다.

HEK293 세포는 인간 배아 신장 세포 293으로도 알려져 있습니다. HEK293 단백질의 접힘 변형은 인체의 실제 단백질 형태에 더 가깝습니다.HEK293에 의해 발현되는 단백질의 접힘 변형은 인체의 실제 단백질 형태에 가깝고, 우리가 개발한 대부분 단백질은 인간 관련 질병의 타깃 또는 인자이기 때문에 HEK293 발현 시스템을 선택했습니다.

인테그린은 전형 이종이량체(알파 및 베타 사슬)이고 막횡단 나선은 알파 및 베타 사슬의 이량체화를 매개합니다.우리가 개발한 인테그린 제품은 세포외 도메인이므로 이종이량체를 안정화하기 위해 산성/염기성 꼬리를 도입해야 합니다.그것은 단백질 활성에 나쁜 영향을 미치지 않을 인테그린의 올바른 구조를 형성하도록 이종이량체의 형태를 촉진할 수 있습니다.

우리는 일반적으로 IMAC(고정 금속 이온 친화성 크로마토그래피)를 사용하여 His 태그가 지정된 단백질을 고순도로 정제합니다. 우리가 생산에 사용한 IMAC 비드는 GE, Qiagen 및 기타 공급업체의 제품입니다.