ADC 접합 키트 — 빠르고 정밀하며 신뢰성을 갖춘 접합

항체-약물 접합체(Antibody-Drug Conjugates, ADCs)는 “항체–링커–페이로드(Antibody-Linker-Payload)” 구조로 이루어진 표적 치료제입니다. 세포독성 페이로드(MMAE, DXd 등)를 항체에 정밀하게 접합함으로써, ADC는 종양세포에 독소를 선택적으로 전달할 수 있습니다. 접합 기술은 ADC의 효능, 안전성 및 제조 용이성에 결정적인 영향을 미칩니다.
당사는 새로운 ADC 접합 키트를 출시했습니다. 이 키트는 빠르고 정밀하며 안정적인 ADC 제조 공정을 제공합니다. 항체의 활성은 그대로 유지하면서도 3시간 이내에 기능성 ADC를 제조할 수 있습니다. 완성된 접합체는 세포 실험이나 동물 실험에 바로 활용 가능하며, 이를 통해 후보 ADC 스크리닝 속도를 크게 높일 수 있습니다.

기술 및 원리

이 키트는 사슬 간 시스테인 접합 기술(Interchain cysteine conjugation technology)을 기반으로 개발되었습니다. 항체의 이황화 결합을 환원하여 반응성 시스테인 잔기를 생성하고, 이를 이용해 부위 비특이적(Non-site-specific) 말레이미드 접합을 수행합니다.

이러한 고전적인 전략을 통해 ADC를 빠르고 정밀하게 제조할 수 있으며, 단 3시간 만에 균일한 야물-항체 비율(DAR; Drug-to-Antibody Ratio)을 지닌 ADC 접합체를 얻을 수 있습니다. 생성된 접합체는 뚜렷한 세포독성을 나타내어, ADC 스크리닝 및 작용 기전 연구에 강력한 도구로 활용됩니다.
Technology & Principle

제품 특징

빠름: 3시간 이내에 ADC 제조 완료

정밀함: DAR 4/8로 철저히 제어된 접합, 항체 활성 유지

효율적: >95% 접합 효율, >80% 회수율 달성

적은 시료 사용:2 mg/mL 이상의 고농도 항체에 사용 가능

간편함: 스핀 컬럼으로 15분 이내에 정제 완료

실험 절차 개요

1. 항체 용액 준비: 1×PBS 완충용액(pH 7.2–7.4) 에서 항체를 2 mg/mL 농도로 조제

2. 항체 환원: 37°C에서 1시간 동안 반응

3. 항체 결합: 23°C에서 1시간 동안 반응

4. 반응 정지: 실온(RT)에서 30분간 반응을 정지

5. 생성된 ADC 정제 및 완충 용액 교환

제품 리스트

키트 구성품

ADC 접합 키트(MMAE, DAR4, 200 μg, 인간 IgG1용, 카탈로그 번호: ADC-P013)를 예시로 설명합니다.
제품 번호 구성품 ID 구성품 규격 (1세트) 보관 조건
Box A
ADC-P013
C01 Reducing reagent 1 vial -20℃
C02 VcMMAE 1 vial -20℃
C03 Quencher reagent 1 vial -20℃
Box B
ADC-P013-1
Buffer01 1xPBS (pH7.2-7.4), 11%Trehalose 5 mL 4℃
Desalting column Desalting Spin column, 0.5mL 1 per 4℃

검증 데이터

다음 ADC 제품은 ADC 접합 키트(MMAE, DAR4, 200 μg, 인간 IgG1용, 카탈로그 번호: ADC-P013) 를 사용하여 제조되었습니다.
항체 출처: 트라스투주맙 바이오시밀러

DAR and Purity Validation by HPLC (HIC + SEC)

DAR and Purity Validation by HPLC (HIC + SEC)
DAR and Purity Validation by HPLC (HIC + SEC)

Figure 1. The ADC was prepared using the ADC Conjugation Kit (MMAE, DAR4) and analyzed by HIC and SEC-HPLC. The average drug-antibody ratio (DAR) is 4.0±0.5, and the purity of the ADC is greater than 95%.

DAR Validation by Mass Spectrometry

DAR Validation by Mass Spectrometry

Figure 2. The DAR (3.82) was calculated from the weighted average of the deconvoluted MS peak areas using LC-MS/MS. The results showed the deconvoluted mass spectra of light chains and heavy chains, and the increase in molecular weight caused by the conjugated payload (1316±3 Da). The heterogeneity in N-glycosylation of heavy chain adds to the complexity of the mass spectrum.

Validation of Antigen Binding Activity

Validation of Antigen Binding Activity

Figure 3. Binding affinity of anti-Her2 antibody and anti-Her2 antibody–MMAE conjugate to human Her2 (Cat. No. HE2-H5225) as determined by BLI (Bio-Layer Interferometry). The conjugate exhibits nanomolar affinity (0.57 nM) for human Her2, comparable to the naked antibody (0.86 nM).

In Vitro Cytotoxicity Validation

 In Vitro Cytotoxicity Validation

Figure 4. In vitro cytotoxicity assays: The ADC can bind and internalize in target cells (SK-BR-3) with high expression of Her2 and release MMAE inside the cells to induce a cytotoxic effect (IC50=0.0058 µg/mL). Meanwhile, no cytotoxicity was observed in Her2 receptor-negative cell lines (MDA-MB-231).

Performance Consistency Across Kit Sizes

 In Vitro Cytotoxicity Validation

Figure 5. In vitro cytotoxicity of products prepared by different size of the ADC Conjugation Kit (Cat. No. ADC-P013, ADC-P014). The result shows very high consistency (RSD<10%).

Stability Validation

 In Vitro Cytotoxicity Validation

Figure 6. The MMAE-ADC was prepared using the ADC Conjugation Kit, which were left at 37℃ for 21 days. The ADCs were analyzed by HIC and SEC-HPLC. The average drug-antibody ratio (DAR) is 4.0±0.5, and the purity of the ADC is greater than 95%.

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